果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法說(shuō)明書

NaOH滴定法 50管/48樣  

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

商品屬性：

產(chǎn)品名稱：果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法

貨號(hào)：LZ-S01402

規(guī)格 : 50管/48樣

測(cè)試方法:NaOH滴定法

產(chǎn)品分類：光合作用系列

發(fā)貨地：上海

測(cè)定意義:

果膠酯酶, 屬果膠酶系,亦稱為果膠酶、果膠甲酯酶、果膠氧化酶。催化水解果膠長(zhǎng)鏈上的甲氧酯水解產(chǎn)生小分子物質(zhì)果膠酸和甲醇, 從而增加果膠在水中的溶解度。廣泛存在于高等植物和可以降解細(xì)胞壁的細(xì)菌和真菌中，起內(nèi)源調(diào)控植物細(xì)胞壁上及細(xì)胞之間果膠含量的作用，在食品工業(yè)中具有及其重要的作用和開(kāi)發(fā)前景。

測(cè)定原理:

果膠酯酶催化水解果膠分子釋放H+，使反應(yīng)體系的pH下降，用堿液維持體系的pH始終保持在7.8(酚酞指示劑維持在粉紅色)，通過(guò)堿消耗的NaOH量反映果膠酯酶的活性。

需自備的儀器和用品：

天平、研缽、離心機(jī)、烘箱。

試劑的組成和配制:

提取液：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前每瓶加雙蒸水 100mL 充分溶解。（如有不溶現(xiàn)象，磁

力攪拌器 40℃加熱，或者超聲波清洗器超聲至完全溶解）

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加少量蒸餾水溶解，然后轉(zhuǎn)入 500mL 容量瓶，用蒸

餾水定容至 500mL。（磁力攪拌器 40℃加熱溶解 3 小時(shí)左右至完全溶解，提前制備）

試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。易揮發(fā)，使用后及時(shí)用封口膜封口。

試劑三：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：用蒸餾水將試劑三稀釋 5 倍，得試劑四。

生化檢測(cè)試劑盒操作步驟：

一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?：確保操作臺(tái)面干凈、整潔，這是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的步。

?二、?仔細(xì)閱讀說(shuō)明書?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說(shuō)明書包含了所有必要的信息和操作指南。

三、樣本采集?：按照說(shuō)明書的指導(dǎo)，正確采集樣本。不同類型的檢測(cè)可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。

?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個(gè)時(shí)間可以用來(lái)進(jìn)行其他活動(dòng)，但不要著急，因?yàn)楹玫慕Y(jié)果值得等待。

六、結(jié)果判讀?：時(shí)間到后，仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會(huì)有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來(lái)判斷結(jié)果。 

NAD+和 NADH 的提取:

1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取：按照血清（漿）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。NADH 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

NADH 的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g

組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3 細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。篘AD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。NADH 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：堿性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)ELISA試劑盒 ，英文名： NEFL ELISA Kit

豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 96T/48T

大鼠質(zhì)膜鈣ATP酶(PMCA)試劑盒 Rat Plasma membrane calcium-anspoing ATPase 2,PMCA Elisa kit

英文名稱HumansCD86ELISAKit人sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

動(dòng)物組織活性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒10次

Sophorajaponicaagglinin,SJAELISA試劑盒槐凝集素(SJA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

F11R重組大鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GFP 綠色熒光蛋白 0.5mgGFP 綠色熒光蛋白

IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽) Protein

CDK2AP2 Protein Human 重組人 CDK2AP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDNF Protein Mouse 重組小鼠 CDNF / ARMETL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法小鼠防御素α1(DEFα1)ELISA試劑盒 ，英文名： DEFα1 ELISA Kit

人腦啡肽(ENK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanenkephalin,ENKELISAKit 96T/48T

大鼠趨化因子9(CXCL9)試劑盒 Rat C-X-C motif chemokine 9,CXCL9 ELISA kit

英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠0脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

基質(zhì)金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)500微升

ELISAKitGM人胃粘液素規(guī)格：48T/96T